核酸膠的配制方法?
核酸膠的配制方法?
取1g瓊脂糖+100ml的TAE緩沖液,微波爐高火加熱至沸騰(沸騰2-3次),降溫到50℃左右時加入EB,混勻后倒入制膠架中,一小時以后就可以使用了。
融化后在37°C下可維持液態數小時,30°C時凝固成膠,多用于對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA片段回收。
它的結構是穩定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內的鹽溶液),在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學滅菌活處理。
首先確定要配膠的濃度,稱好瓊脂糖粉末的重量,加好相應量的TAE或TBE緩沖液,放到微波爐里面煮5分鐘,倒至模具里面,插好梳子待其凝結就行
瓊脂糖凝膠電泳常見問題有哪些
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳常見為題都有哪些?
DNA帶模糊
DNA降解:瓊脂糖凝膠電泳試驗中要避免核酸酶污染
電泳緩沖液陳舊:電泳緩沖液多系使用后,離子強度降解,PH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳實驗,建議經常更換電泳緩沖液。
所用電泳條件不合適:電泳時電壓不應超過20V/cm,溫度
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